Chercheurs impliqués
Chercheurs qui ont travaillé sur cet axe :
- Pr F. Paris
- Pr E. Huyghe
- Dr G. Perez
- Dr R. Mieusset
- Dr S. Hamdi
Pour contacter une personne référente sur cet axe de recherche, merci d’appeler Françoise Paris au 06 15 10 63 71.
1 – Analyse phénotypique et moléculaire de populations infertiles et/ou ayant une anomalie du développement génital
Chercheurs qui ont travaillé sur cet axe :
- Pr F. Paris
- Pr E. Huyghe
- Dr R. Mieusset
- Dr S. Hamdi
a) Problématique
Implication régionale dans la thématique
Afin de répondre à cette problématique, unir nos forces a été un véritable atout pour améliorer le phénotypage des patients et la recherche moléculaire
- Anomalies du tractus génital masculin (Dr Mieusset, Dr Hamdi, Pr Huyghe)
- Phénotypage clinique (vésicules séminales, épididyme, déférents, reins), biologique (axe gonadotrope, marqueurs séminaux), génétique CFTR (Palat et al., 2016) et ADGRG2 (Mieusset et al. 2017)
- VDG (DSD) / Cryptorchidies – DSD complexe 1/5000, cryptorchidies 1% (Pr. Kalfa et Pr. Paris) et Ouverture whole genome (Pr. Paris)
- Clinique Toulouse + Montpellier
- Département diagnostic de Biologie Moléculaire VDG (Pr. Paris, Paris et al 2013, Paris et al 2018)
- Implication / impact des PEE (Kalfa, Paris et al 2019, Paris et al 2006)
L’importance d’un phénotypage précis
Les anomalies de développement du tractus génital masculin se répartissent tout au long d’un spectre allant des variations du développement génital (VDG), ou Désordres du développement sexuel (DSD) en passant par des anomalies isolées des canaux efférents, des cryptorchidies jusqu’à des tableaux d’infertilité. Il est indispensable de bien phénotyper ces patients sur le plan clinique, hormonal, échographique et moléculaire de façon à mieux comprendre les mécanismes qui sous-tendent ces anomalies ainsi que leur retentissement en particulier sur la fertilité.
Contour des VDG
b) Projets
- Évaluer nos cohortes de patients porteurs de VDG suivis sur Toulouse et Montpellier concernant leur sexualité et leur fertilité (Pr Huyghe, Pr Paris, Dr Almont et Dr Baudin)
- Développer des outils de biologie moléculaire (banque de minigènes) de façon à mieux comprendre la mécanistique des anomalies moléculaires retrouvées, au sein du laboratoire de génétique (Pr Paris) du CRDevGen, chez des patients porteurs de VDG en s’intéressant de façon particulière aux variants introniques (Pr Paris, Mme Gennetier)
2 – Organoïdes de tubules séminifères, épididymes, et déférents
Chercheurs qui ont travaillé sur cet axe :
- Pr E. Huyghe
- Dr G. Perez
a) Problématique
- Problème majeur en biologie et médecine de la reproduction est l’absence de modèle des organes-cibles
- Les cultures cellulaires conventionnelles ne renseignent pas de la complexité spatiale des tissus
- Les modèles animaux donnent des résultats non reproductibles : la reproduction est la fonction la plus éloignée entre les espèces.
b) Projet ORHUMAN
ORHUMAN : ORganoïdes HUmains de l’appareil reproducteur MasculiN
La solution : les organoïdes de tubes séminifères, épididymes et de déférents.
- Les organoïdes sont des structures tridimensionnelles dérivées de cellules souches adultes ou pluripotentes.
- Particularité fondamentale : capacité d’auto-organisation des cellules mises en culture rappelant un programme développemental.
- Obtention d’un pseudo-organe miniaturisé (200μm à 1000μm) accueillant tous les types cellulaires de l’organe en question et présentant une fonction similaire au tissu d’origine
La solution : les organoïdes humains de tubes séminifères, épididymes et de déférents.
- Les organoïdes de tubes séminifères : cellules pluripotentes ; la méthode de culture pour différencier les cultures d’IPSCs (ou EC) en cellules de Sertoli est connue (ajouts de BMP4, FGF9, Activine A dans les milieux de cultures)
- Les organoïdes d’épididyme et déférent : cellules souches adultes en voie de caractérisation (double marquage* – intracellulaire et de surface)
- Une innovation majeure utilisée : un processus de culture novateur (non-public pour cause de brevet)
Les cellules seront issues de patients en mort encéphalique (PMO) le protocole est approuvé et enregistré à l’ABM sous le n°PFS19-010.
Organoïdes de tractus masculin humain (Dr. G. Perez, R.Soudy. DEFE)
- Financement : Région Occitanie et l’entreprise Urosphère SAS (financement de 36 mois renouvelable)
- Partenariat : Urosphere SAS et Inserm U1220 (accueille la plateforme « Organoïdes » labelisée GIS IBiSA). Une collaboration en 2016 entre Urosphere et l’U1220 a permis la mise au point des premières cultures d’organoïdes humains de vessie.
- Durée ORHUMAN : 5 ans minimum, début en février 2020.
- Personnel :
- Un chercheur post-doctorant est recruté à plein-temps sur le projet
- Un ingénieur de recherche de Urosphere est mobilisé sur le projet
- Un à deux doctorants seront formés grâce au projet
- Des stagiaires seront accueillis sur toute la période du projet
- Un module de formation en école doctorale (ED BSB) sera éventuellement proposé.